比色皿( 又名吸收池,樣品池) 用來裝參比液、樣品液。配套在光譜分析儀器上,如分光光度計,血線蛋白分析儀,粒度分析儀等。比色皿是分光光度計的重要配件,一般為長方體,其底及兩側(cè)為磨毛玻璃,另兩面為光學(xué)玻璃制成的透光面粘結(jié)而成。
比色皿的使用
在使用比色皿時,兩個透光面要*平行,并垂直置于比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。
比色皿一般為長方體,其底及兩側(cè)為磨毛玻璃,另兩面為光學(xué)玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫?zé)Y(jié)和膠粘合而成。所以使用時應(yīng)注意以下幾點。
(1) 拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃,避免接觸光學(xué)面。同時注意輕拿輕放,防止破損。
(2) 比色皿中不應(yīng)長期盛放含有腐蝕玻璃物質(zhì)的溶液。
(3) 比色皿高溫后易爆裂,因此不應(yīng)放在火焰或電爐上加熱或干燥箱內(nèi)烘烤。
(4) 當比色皿里面被污染,應(yīng)用無水乙醇清洗,并晾干或及時擦拭干凈。
(5) 比色皿的透光面不應(yīng)與硬物或臟物接觸。
(6)盛裝溶液時,高度應(yīng)為比色皿的2 /3 處,光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。
(7)比色皿中的液體,應(yīng)沿毛面傾斜,慢慢倒掉,不要將比色皿翻轉(zhuǎn),直接口向下放在干凈的濾紙上吸干剩余液,然后用蒸餾水沖洗比色皿內(nèi)部倒掉(操作同上)避免液體外流,使第2次測量時不用擦拭比色皿,不致因擦拭帶來的誤差。
(8)比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水,在比色波長下進行比較,誤差在±0.001吸光度以內(nèi)的比色皿選出4-8個進行比色測定,可避免因比色皿差異造成測量誤差
(9)色皿在使用后,應(yīng)立即用水沖洗干凈。必要時可用1:1的鹽酸浸泡,然后用水沖洗干凈。
比色皿的管理維護
(1) 按照實驗中所使用的波長來選擇相應(yīng)的比色皿( 玻璃或者石英) ,紫外光區(qū)用石英比色皿,而可見光區(qū)既可以使用玻璃比色皿,又可以使用石英比色皿??紤]到價格問題,可見光區(qū)選用玻璃比色皿。盡量做到專人或者專組,用完清理后就交回。這樣不易搞混不同的比色皿,也不影響比色皿間的配對。
(2) 盡量做到每個實驗每臺紫外分光光度計有的配套比色皿,不相互混用。如有交叉使用,可記錄在冊,下次恢復(fù)正常。
(3) 用完即清洗,清洗后在通風(fēng)陰涼處干燥,等*干燥后放入相應(yīng)裝具中。放置時,裝具保持清潔干燥,比色皿應(yīng)秉承“光面朝上,毛面在兩側(cè)”的原則,這樣便于抓取兩毛面拿出使用,不易弄污光面。
比色皿的使用注意事項
1.拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃,避免接觸光學(xué)面,用力不可過大。
2.不得將光學(xué)面與硬物或臟物接觸。盛裝溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢順著同一方向擦拭。
3.凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液,不得長期盛放在比色皿中。
4.比色皿在使用后,應(yīng)立即用水沖洗干凈。必要時可用1:1的鹽酸浸泡,然后用水沖洗干凈。
5.不能將比色皿放在火焰或電爐上進行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤.
6.在測量時如對比色皿有懷疑,可自行檢測??蓪⒉ㄩL選擇在實際使用的波長上,將一套比色皿都注入蒸餾水,將其中一只的透射比調(diào)至95%(數(shù)顯儀器調(diào)置100%)處,測量其它各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%即可配套使用。
7、比色皿換向后誤差可達4%一7%左右。所以在*確測量時;定要看準比色皿箭頭標志。如無標志,可作配套檢定后按方向在毛玻璃上端作上箭頭一致的標記。以避免操作時搞反。
8、比色皿使用時請勿碰撞。
比色皿的清洗
分光光度法中比色皿潔凈與否是影響測定準確度的因素之一。因此,必須重視選擇正確的洗凈方法。
如果你測定溶液是酸,如果不干凈,就用弱堿溶液洗,要是你測定溶液是堿,如果不干凈,就用弱酸溶液洗,要是你測定溶液是有機物質(zhì),如果不干凈,就用有機溶劑,比如酒精等溶液洗。
應(yīng)按照測定的各種試劑,采用溶解中和的方法進行清洗,原則上是: 一不能損壞比色皿的結(jié)構(gòu)和透光性能; 二能夠采用中和溶解的方法來達到比色皿干凈如初的效果。而分光光度計中比色皿潔凈與否,則是影響測定準確度的因素之一。
比色皿必須保持清潔和無傷痕,玻璃和石英比色皿通??捎美渌峄蚓凭?、*醚、丙酮、正己烷等有機溶劑清洗。
比色皿清洗液:濃鹽酸:甲醇:水=1:4:3
如果比色皿被有機物污染,宜用鹽酸—乙醇(1:2)混合液浸洗,也可用相應(yīng)的有機溶劑如醇醚混合物浸泡洗滌。如:油脂污染可用石油醚浸洗,鉻天青顯色劑污染可用硝酸(1:2)浸洗等。比色皿不可用堿液洗滌,也不能用硬布、毛刷刷洗。
鉻酸洗液效果不錯,但浸泡時間不宜過長,否則會腐蝕掉比色皿的粘接劑使其散架。另外因為它會在比色皿壁上吸附而出現(xiàn)一層鉻化物的薄膜,這種薄膜很難去除,鉻酸清洗后的比色皿在紫外區(qū)間基本不透光,導(dǎo)致不能使用。
稀釋的酸浸泡,效果不錯,但酸濃度不能太高。也可用冷的或溫?zé)岬模?0~50℃)陰離子表面活性劑的碳酸鈉溶液(2%)浸泡,可加熱10分鐘左右。對于有色物質(zhì)的污染可用HCL(3mol/L)-乙醇(1+1)溶液洗滌。有色物質(zhì)污染的比色皿用鹽酸:乙醇(1:2)浸泡一段時間,顏色就去掉了。