移液槍是移液器的一種,常用于實驗室少量或微量液體的移取,它有各種不同的規(guī)格,如單通道移液槍或多通道移液槍。在這兩種移液槍下又各自包括不同的量程,如0.1-2.5μL、0.5-10μL、10-100μL、20-200μL、100-1000μL等等。不同規(guī)格的移液槍配套使用不同大小的槍頭,不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的形狀也略有不同,但工作原理及操作方法基本一致。移液槍屬精密儀器,使用及存放時均要小心謹(jǐn)慎,防止損壞,避免影響其量程。
移液槍的結(jié)構(gòu)與工作原理
移液槍一般包括控制match按鈕(不同廠家設(shè)計不同,通常也通過此按鈕進(jìn)行吸液體積調(diào)節(jié))、吸頭推卸按鈕、體積顯示窗、套筒、彈性吸嘴、吸頭。
移液器的實質(zhì)是一個活塞式吸管,利用空氣排放原理進(jìn)行工作,以活塞套內(nèi)移動的距離確定移液槍的容量。依據(jù)移液模式的不同,可分為內(nèi)置活塞式移液模式和外置活塞式移液模式。我們?nèi)粘J褂玫臑閮?nèi)置活塞式移液模式。
內(nèi)置活塞式移液模式的吸頭大多是通用的,但操作過程中比較容易發(fā)生交叉式污染,并且不宜吸取高粘稠度液體、揮發(fā)性較大的液體;外置活塞式移液模式中活塞與液體之間沒有空氣段,活塞為一次性的,對于粘稠度較大的液體,也能實現(xiàn)*確移液,另外,由于無空氣間隔,避免了樣品于空氣接觸可能發(fā)生的氣霧交叉污染,因此非常適合是珍貴的試劑、生物樣品的移取。
操作過程及注意事項
移液六部:設(shè)定容量值;裝槍頭;預(yù)洗槍頭;吸液;排液;退槍頭。
1設(shè)定容量值
操作之前請先選擇正確量程的移液槍,在吸頭大量程的35-100%范圍內(nèi)操作可提高操作準(zhǔn)確性與重復(fù)性。量程調(diào)節(jié)可分為兩步:先進(jìn)行粗調(diào),通過旋轉(zhuǎn)按鈕將體積迅速調(diào)整至接近預(yù)想值。之后進(jìn)行細(xì)調(diào),將移液槍橫置,通過調(diào)節(jié)按鈕慢慢調(diào)至預(yù)想值。當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程,這樣可避免“機械回沖”,確保更高準(zhǔn)確性。當(dāng)由大量程調(diào)節(jié)至小量程時,直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。此步驟需注意,在調(diào)節(jié)槍的過程中切忌超過大或小量程,以免損害移液槍的*確度。
2設(shè)定容量值
移液槍頂端插入槍頭,套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。注意不可用力敲擊吸頭。此操作會使槍頭損壞,甚至造成移液槍套柄磨損,從而影響其密封性。
3預(yù)洗槍頭
用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次。對于微量移液器,該操作有助于內(nèi)壁吸附,并且可以使大量程吸頭內(nèi)部的空氣等于樣品溫度,保證操作的一致性。注意高溫或者低溫液體請不要潤洗。
4吸液
先將移液槍排放按鈕按至*一停點,再將槍頭盡量保持垂直狀態(tài)浸入液面,保持移液器在與垂直角度成20°范圍內(nèi)。槍頭浸入深度可參考圖七中所示建議深度,浸入太深會吸入過多的液體;相反,槍頭位置過于接近表面會吸入空氣;兩種操作都會造成吸入量不準(zhǔn)確。吸液時保持勻速連貫移液,控制好移液速度。快速或不平穩(wěn)的吸液會使液體噴濺,產(chǎn)生氣霧、套柄污染以及樣品損失。吸液后在液面中保持一秒鐘再將槍頭平緩移開,并輕靠器壁去除槍頭外壁掛存的液體。
5排液
排液時首先確認(rèn)槍頭內(nèi)無氣泡,槍頭尖輕靠容器內(nèi)壁,排出剩余樣品,之后使其沿容器內(nèi)壁向上滑動,避免液體粘在槍頭口上。圖九所示另外兩種技巧同樣適用于水溶(非粘性)液。
6退槍頭
按動槍頭推卸按鈕卸掉使用過的槍頭。注意與新槍頭分開放置,以免發(fā)生交叉污染。移液槍使用后調(diào)回大量程。
在使用移液槍時也應(yīng)注意溫度對移液準(zhǔn)確性的影響。如理想的移液溫度是21.5℃(±1℃)。儀器和樣品的溫度應(yīng)與工作的室溫相同,并且要避開可導(dǎo)致大幅或突然溫度變化的通風(fēng)或陽光照射區(qū)域。另外,經(jīng)過長時間的移液,手上的溫度會使移液槍變熱,移液槍內(nèi)部空氣膨脹,也會導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。因此在兩次移液操作之間,應(yīng)將移液槍放回支架,以避免手溫對移液的影響。
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