飼料及其原料中嘔吐霉素含量快速檢測(cè)解決方案

一、飼料行業(yè)霉菌毒素污染概述

養(yǎng)殖行業(yè)的源頭在飼料，飼料質(zhì)量的好壞直接影響乳品的優(yōu)劣，因此需從源頭上加以控制。飼料中最主要的污染物來自霉菌毒素，不僅會(huì)通過的新陳代新帶入生乳中，產(chǎn)生所謂的“毒奶"，更要的是霉菌毒素會(huì)危害奶牛的健康并嚴(yán)重影響產(chǎn)奶水平，造成隱形的重大經(jīng)濟(jì)損失。




霉菌毒素(mycotoxins)是某些真菌在污染的糧食和谷物的生長繁殖過程中，產(chǎn)生的具有毒害作用的次級(jí)代謝產(chǎn)物，由其引起的中毒癥狀被稱作是霉菌毒素中毒癥狀(mycotoxicoses)。目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)霉菌毒素的種類達(dá)400多種，其化學(xué)、生物學(xué)和毒理學(xué)性質(zhì)多種多樣，主要的毒性作用包括致癌作用、遺傳毒性、致畸作用、肝細(xì)胞毒性、中毒性腎損害、生殖紊亂和免疫抑制。霉菌毒素的存在不僅給人類及牲畜的健康帶來極大的危害，也造成了相應(yīng)的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)聯(lián)合國糧食與農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,FAO)統(tǒng)計(jì)，全球每年約有25%的農(nóng)作物被霉菌毒素污染，約2%的農(nóng)作物因污染嚴(yán)重而失去營養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，造成數(shù)千億美元的經(jīng)濟(jì)損失。




霉菌毒素是飼料的主要污染物之一，目前為止，全*界已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了300多種結(jié)構(gòu)不同的霉菌毒素，其中已經(jīng)被分離鑒定的有20多種。主要有：黃曲霉毒素 B1(Aflatoxin，AFB1)，玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEN)、嘔吐毒素(deoxynivalenol，DON)等。 當(dāng)動(dòng)物采食被霉菌毒素污染的日糧后，健康狀況會(huì)受到影響，表現(xiàn)出來的癥狀可能是多種多樣的 ，比如采食量下降、生長速度變慢、抗氧化能力降低，免疫力受到抑制等，但無一例外， 最終都會(huì)影響到人畜健康和食品安全， 帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在霉菌毒素管控上，我國《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》和《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定 》對(duì)飼料中霉菌毒素的*做出了明確的要求， 對(duì)保障飼料衛(wèi)生安全、保護(hù)動(dòng)物健康有重要的作用。




二、現(xiàn)有檢測(cè)方法比較

目前霉菌毒素的檢測(cè)方法主要分為兩大類:即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備，如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(cè)(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。

結(jié)果準(zhǔn)確、法定認(rèn)可是理化方法最大的優(yōu)點(diǎn)，但是儀器設(shè)備價(jià)格昂貴，前處理過程復(fù)雜、操作繁瑣、效率低，成本*，因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測(cè)，一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測(cè)卡是企業(yè)常用的快速檢測(cè)方法，但也均存在各自的優(yōu)缺點(diǎn):ELISA 方法能靈敏度相對(duì)較高，且能定量檢測(cè)，但操作過程相對(duì)復(fù)雜，對(duì)環(huán)境和人員要求高，環(huán)境干擾因素復(fù)雜，重復(fù)性較差;膠體金檢測(cè)卡可以滿足現(xiàn)場(chǎng)快速的要求，能在5-10min內(nèi)快速測(cè)定，但是只能定性，且靈敏度較低，肉眼觀察主觀性較強(qiáng)，重復(fù)性差。




三、飼料及其原料中嘔吐霉素含量快速檢測(cè)解決方案介紹

飼料及其原料中嘔吐霉素含量快速檢測(cè)解決方案選用CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）、電子天平、離心機(jī)、粉粹機(jī) 、渦旋振蕩器檢測(cè)設(shè)備，該方法操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，整體測(cè)試時(shí)間15分鐘左右。【真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀←←點(diǎn)擊此處了解產(chǎn)品信息】

1、實(shí)驗(yàn)所需儀器：

1.CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）

2.電子天平

3.離心機(jī)

4.粉粹機(jī)  

5.渦旋振蕩器

6.可調(diào)移液器1000-5000ul 可調(diào)移液器 20-200ul




2、樣品處理：

1.樣品提取液配置：取一份體積的提取液加九份體積的蒸餾水，混勻后即為樣品提取液。

2.樣品處理：準(zhǔn)確稱取2.0g粉碎均勻的谷物樣本，放入50ml離心管或者錐形瓶中，加入10ml樣品提取液，用旋渦振蕩器震蕩3分鐘混勻，混勻后即為樣品液。

3.混勻后，取1.5ml均勻的樣品液在離心管，并在3500轉(zhuǎn)以上離心5分鐘。

4.配待測(cè)液：取離心液上清液100ul+300ul樣品提取液震蕩5秒混勻。









3、樣品檢測(cè)：

1.取60ul待測(cè)液+60ul熒光標(biāo)記物,放入新的離心管中

2.把移液器刻度調(diào)至90ul，然后在離心管中吸吐3次液體（避免氣泡出現(xiàn)）

3.混勻之后取90ul滴入檢測(cè)卡內(nèi)（本步驟應(yīng)該在30s內(nèi)完成），滴入完成之后，立即將檢測(cè)卡放入CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀中的恒溫孵育器內(nèi)孵育8分鐘后進(jìn)行檢測(cè)。




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