糧食谷物中嘔吐霉素含量快速檢測(cè)解決方案

一、糧油谷物飼料中霉菌毒素污染情況

霉菌毒素是由產(chǎn)毒真菌在適宜的環(huán)境條件下產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物．根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織資料，世界上約有 25%的谷物不同程度地受到霉菌毒素的污染而不能食用，不僅在經(jīng)濟(jì)上造成了巨大的損失，而且由真菌產(chǎn)生的霉菌毒素還能引起人畜中毒，嚴(yán)重時(shí)甚至可以致癌。




目前已知能產(chǎn)生霉菌毒素的真菌有 150 余種，產(chǎn)生的霉菌毒素約有300 種，其中包括黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮及其衍生物類(lèi)毒素、嘔吐毒素、伏馬菌素、T2 毒素等。真菌的生長(zhǎng)和繁殖都需要一定的溫、濕度條件，最適宜生長(zhǎng)溫度一般為 20～30℃，霉菌繁殖產(chǎn)毒的最適溫度為 25～30℃。其中曲霉菌屬最適宜生長(zhǎng)溫度為 30℃左右，青霉菌屬為 25℃左右，鐮刀菌屬一般為 25℃左右。當(dāng)真菌處于干燥、低溫或處于與其他真菌競(jìng)爭(zhēng)的應(yīng)激情況時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生霉菌毒素，由于真菌生長(zhǎng)有一定的地域性，因此，不同區(qū)域占優(yōu)勢(shì)的霉菌毒素種類(lèi)也不同，如在亞熱帶和熱帶地區(qū)，農(nóng)產(chǎn)品和飼料主要被黃**素和某些赭**素污染;而玉米赤霉烯酮、嘔吐霉素、赭曲霉毒素 A、T-2 毒素、煙曲霉毒素則在溫帶地區(qū)占有顯著優(yōu)勢(shì)。




據(jù)我國(guó)糧油谷物飼料霉變情況調(diào)查報(bào)告，真菌的檢出率和含量，南方地區(qū)都大大高于北方地區(qū)，特別是 5～9 月份，南方地區(qū)的平均氣溫都處于 20℃以上，平均相對(duì)濕度在 80%以上，這種高溫高濕的環(huán)境條件下，真菌生長(zhǎng)繁殖最為旺盛，谷物飼料霉變大多發(fā)生在這個(gè)季節(jié);北方的夏季雖然溫度較高，但相對(duì)濕度較低，不易霉變，但常因加工、運(yùn)輸或貯存不當(dāng)而產(chǎn)生霉菌毒素。




二、現(xiàn)有檢測(cè)方法比較

目前真菌毒素、重金屬、農(nóng)藥殘留等有毒有害物質(zhì)的檢測(cè)方法主要分為兩大類(lèi)：即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備，如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)、膠體金免疫層析法、熒光定量免疫層析法等。




結(jié)果準(zhǔn)確、法定認(rèn)可是理化方法最大的優(yōu)點(diǎn)，但是儀器設(shè)備價(jià)格昂貴，前處理過(guò)程復(fù)雜、操作繁瑣、效率低，成本*，因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測(cè)，一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測(cè)卡是企業(yè)常用的快速檢測(cè)方法，但也均存在各自的優(yōu)缺點(diǎn)：ELISA 方法能靈敏度相對(duì)較高，且能定量檢測(cè)，但操作過(guò)程相對(duì)復(fù)雜，對(duì)環(huán)境和人員要求高，環(huán)境干擾因素復(fù)雜，重復(fù)性較差;膠體金檢測(cè)卡可以滿足現(xiàn)場(chǎng)快速的要求，能在5-10min內(nèi)快速測(cè)定，但是只能定性，且靈敏度較低，肉眼觀察主觀性較強(qiáng)，重復(fù)性差。




三、糧食谷物中嘔吐霉素含量快速檢測(cè)解決方案方案介紹

糧食谷物中嘔吐霉素含量快速檢測(cè)解決方案選用CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）、電子天平、離心機(jī)、粉粹機(jī) 、渦旋振蕩器檢測(cè)設(shè)備，該方法操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確，整體測(cè)試時(shí)間15分鐘左右。【真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀←←點(diǎn)擊此處了解產(chǎn)品信息】

1、實(shí)驗(yàn)所需儀器：

1.CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）

2.電子天平

3.離心機(jī)

4.粉粹機(jī)  

5.渦旋振蕩器

6.可調(diào)移液器1000-5000ul 可調(diào)移液器 20-200ul




2、樣品處理：

1.樣品提取液配置：取一份體積的提取液加九份體積的蒸餾水，混勻后即為樣品提取液。

2.樣品處理：準(zhǔn)確稱(chēng)取2.0g粉碎均勻的谷物樣本，放入50ml離心管或者錐形瓶中，加入10ml樣品提取液，用旋渦振蕩器震蕩3分鐘混勻，混勻后即為樣品液。

3.混勻后，取1.5ml均勻的樣品液在離心管，并在3500轉(zhuǎn)以上離心5分鐘。

4.配待測(cè)液：取離心液上清液100ul+300ul樣品提取液震蕩5秒混勻。









3、樣品檢測(cè)：

1.取60ul待測(cè)液+60ul熒光標(biāo)記物,放入新的離心管中

2.把移液器刻度調(diào)至90ul，然后在離心管中吸吐3次液體（避免氣泡出現(xiàn)）

3.混勻之后取90ul滴入檢測(cè)卡內(nèi)（本步驟應(yīng)該在30s內(nèi)完成），滴入完成之后，立即將檢測(cè)卡放入CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀中的恒溫孵育器內(nèi)孵育8分鐘后進(jìn)行檢測(cè)。




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